Engenharia genética/Amplificação por PCR do gene GFP de Aequorea victoria: diferenças entre revisões
[edição não verificada] | [edição não verificada] |
Conteúdo apagado Conteúdo adicionado
Sem resumo de edição |
Sem resumo de edição |
||
Linha 5:
# Fazer uma diluição de 50X, em 2 tubos ''eppendorf'' marcados (1 e 2), fazendo 2 diluições sucessivas de 10X a partir de 100 mL de Taq e 900 mL do tampão de diluição 1X e depois 5X (200 μL → 800 μL);
# Fazer 3 diluições sucessivas de 2X em 3 tubos ''eppendorf'' marcados (3, 4 e 5) a partir de 500
# Colocar 20
# Adicionar 20
# Colocar os tubos em gelo;
# Depois de agitadas no ''vortex'', as misturas são sujeitas a PCR de acordo com as condições especificadas na tabela abaixo;
# Durante o tempo de espera, desenhar no computador os ''primers'' necessários para amplificar o gene GFP;
# Misturar 5
# Aplicar as amostras num gel de agarose 0,8%;
# O instrutor irá fazer um gel com as amostras correspondentes aos produtos de PCR de referência;
|