Engenharia genética/Desenho dos primers: diferenças entre revisões
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Linha 151:
* '''Nota''': A sequência codificante (CDS) deve começar com
Como pode observar, a sequência apresentada é a da cadeia complementar, de modo que o codão '''''start''''' está na base (cat ⇒ atg) e o codão '''''stop''''' está no topo (tta ⇒ taa).
Linha 161:
* Vamos amplificar o gene GFP inteiro, incluindo os codões ''start'' e ''stop'' (mas nada fora do gene).
* Precisamos de dois ''primers'' para o PCR, um ''primer '''forward''''' e um ''primer '''reverse
O ''primer '''forward''''' liga-se à cadeia Crick e o ''primer '''reverse''''' liga-se à cadeia Watson.
▲Precisamos de dois primers para o PCR, um primer forward e um primer reverse. O primer forward vai ligar a cadeia Crick e o primer reverse vai ligar a cadeia Watson.
Queremos uma Tm 49-51C. Um programa denominado “Oligonucleotide properties calulator” pode calcular o Tm.
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